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二、噬菌体侵染细菌实验(重点!)

基因的表达与DNA的复制 · 高一
先确认一下:这一关能不能学
上面这几节是它的地基 —— 没通的话,补完再回来,比硬啃快得多。
讲清楚它是什么

定义 利用放射性同位素标记技术,追踪噬菌体侵染细菌过程中DNA和蛋白质去向的实验。

从哪来 本节为起点,无前置知识点记录,直接基于高一生物必修二“遗传的分子基础”开篇引入。

为什么 核心逻辑在于“区分”。DNA和蛋白质都是大分子,若混在一起无法判断谁是遗传物质。噬菌体结构简单(仅DNA和蛋白质外壳),且侵染时外壳留在外面、内部物质进入细菌,提供了天然的“分离”场景。通过分别标记DNA($^{32}P$)和蛋白质($^{35}S$),观察放射性最终出现在哪里,就能推断哪种物质进入了细菌并参与了子代噬菌体的构建,从而确定遗传物质。

适合:逻辑推理型、喜欢因果链条的学生** 采用“侦探破案”逻辑。 1. **疑点
谁是凶手(遗传物质)?嫌疑人有两个:DNA和蛋白质。 2. 线索:凶手必须进入受害者(细菌)体内作案。 3. 工具:给嫌疑人穿不同颜色的衣服(同位素标记)。DNA穿红衣服($^{32}P$),蛋白质穿蓝衣服($^{35}S$)。 4. 过程:让嫌疑人去作案(侵染),然后清洗现场(搅拌、离心)。 5. 结果:看哪件衣服留在了受害者体内。 6. 结论:红衣服(DNA)进去了,蓝衣服(蛋白质)没进去。所以DNA是凶手。 *重点强调:为什么必须搅拌?为了把没进去的蓝衣服(外壳)洗下来,确保检测到的放射性只来自进去的部分。*
适合:形象思维型、对抽象概念理解困难的学生** 采用“快递包裹”类比。 1. **场景
噬菌体是一个快递包裹,细菌是收件人。 2. 结构:包裹外壳是蛋白质(箱子),里面装的东西是DNA(商品)。 3. 操作: - 实验组1:在箱子上贴荧光标签($^{35}S$)。 - 实验组2:在商品上贴荧光标签($^{32}P$)。 4. 投递:包裹送到细菌门口。 5. 关键动作:快递员(搅拌器)把空箱子(蛋白质外壳)剥下来扔掉(离心沉淀分离)。 6. 检查: - 看箱子上的荧光:在废液里(上清液)。 - 看商品上的荧光:在细菌体内(沉淀物)。 7. 结论:只有商品(DNA)被送进了细菌内部并发挥作用,箱子(蛋白质)只是运输工具。
适合:实验操作型、关注细节和步骤的学生** 采用“实验流程拆解”法。 1. **标记
先培养带标记的大肠杆菌,再用噬菌体侵染带标记的细菌,获得带标记的噬菌体。(强调:不能直接标记噬菌体,因为它是病毒,无独立代谢)。 2. 侵染:让标记好的噬菌体与未标记的细菌混合,保温一段时间。(强调:时间要适中,太短没侵染完,太长细菌裂解释放子代)。 3. 搅拌:用搅拌器搅拌。(目的:使吸附在细菌表面的噬菌体颗粒与细菌分离,即把蛋白质外壳剥离)。 4. 离心:离心分离。(原理:细菌重,沉到底部(沉淀物);噬菌体外壳轻,浮在上面(上清液))。 5. 检测:检测上清液和沉淀物的放射性。 6. 对比: - $^{35}S$组:上清液放射性高,沉淀物低。 - $^{32}P$组:沉淀物放射性高,上清液低。 *重点强调:搅拌不充分会导致$^{35}S$组沉淀物放射性偏高;保温时间过长会导致$^{32}P$组上清液放射性偏高。*
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练一道
基础题
在噬菌体侵染细菌实验中,若用$^{35}S$标记噬菌体的蛋白质外壳,侵染并搅拌离心后,放射性主要分布在( ) A. 沉淀物中 B. 上清液中 C. 沉淀物和上清液中平均分布 D. 细菌内部
变式
某同学进行噬菌体侵染细菌实验,发现$^{32}P$标记组的上清液放射性异常偏高。请分析可能的原因(至少两点)。
看解答过程
$^{35}S$标记的是蛋白质外壳。侵染时,蛋白质外壳留在细菌外面。搅拌的目的是使吸附在细菌表面的噬菌体颗粒与细菌分离。离心后,细菌(重)形成沉淀物,噬菌体外壳(轻)分布在上清液中。因此放射性主要在上清液中。
试试手自己判
检测题
在噬菌体侵染细菌实验中,若搅拌不充分,对$^{35}S$标记组和$^{32}P$标记组的放射性分布分别有什么影响?
看答案和判分标准
答案:- $^{35}S$组:沉淀物中放射性偏高(因为部分未剥离的蛋白质外壳随细菌沉淀)。 - $^{32}P$组:影响较小或无明显变化(因为DNA已注入细菌内部,搅拌主要影响外部外壳)。
判对标准:
1. 明确指出$^{35}S$组沉淀物放射性偏高(2分)。
2. 解释原因是蛋白质外壳未完全剥离,随细菌沉淀(2分)。
3. 指出$^{32}P$组影响不大或无显著影响(1分)。
4. 解释原因是DNA已注入细菌内部,不受搅拌影响(1分)。
总分6分,答对3点及以上为掌握。
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