定义 两个或多个动物细胞结合形成一个具有双亲遗传物质的杂种细胞的过程。
从哪来 建立在“2. 培养基的配制”之上,因为融合后的杂种细胞需要在特定的液体培养基中悬浮生长,且培养基成分直接影响细胞存活与融合效率。
为什么 动物细胞没有细胞壁,细胞膜具有流动性,这是融合的结构基础。但自然状态下细胞膜表面带负电荷,存在静电排斥力,且细胞膜结构稳定,难以自发融合。因此,必须借助物理法(如电脉冲改变膜通透性)或化学法(如PEG诱导膜结构重排)降低排斥力并促进膜融合,最终实现细胞质和细胞核的合并。
类比法:水滴融合模型**
**适合学生
形象思维强、对抽象概念理解困难的学生。
讲解:想象两个小水滴(细胞)在荷叶上。平时它们因为表面张力和静电(类比电荷排斥)保持独立。如果你用一根针轻轻触碰(物理法)或者在周围撒一点特殊的胶水(化学法PEG),它们就会克服阻力合并成一个大水滴。大水滴里包含了原来两个水滴的所有成分,这就是融合。
工程法:静电与膜流变**
**适合学生
逻辑性强、喜欢探究原理、理科基础较好的学生。
讲解:细胞膜表面糖蛋白带负电,同性相斥。融合的关键是打破这种静电势垒。PEG(聚乙二醇)是一种高分子聚合物,它能吸附在细胞膜表面,改变膜的脂质双分子层排列,降低膜的表面张力,使相邻细胞膜发生局部融合,进而扩展为完全融合。这不仅是“粘”在一起,而是膜结构的重新整合。
对比法:植物vs动物**
**适合学生
已有植物组织培养知识、需要区分易混点的学生。
讲解:植物细胞融合前必须去壁(原生质体),因为细胞壁阻碍接触;动物细胞融合前不需要去壁,因为本来就没壁。植物融合常用PEG或高Ca²⁺-高pH法;动物融合常用PEG、灭活病毒或电激。重点在于:动物细胞融合是制备单克隆抗体的核心步骤,而植物细胞融合主要用于培育杂种植株。